REAL-TIME PCR សម្រាប់ធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យ
មន្ទីរពេទ្យ ជោរៃ ភ្នំពេញ យើងខ្ញុំ មានកិត្តិយស សូមជម្រាបជូនដំណឹងដល់អតិថិជនទាំងអស់ អោយបានជ្រាបថា នៅថ្ងៃទី 15/02/2019 មន្ទីរពេទ្យ នឹងដាក់ដំណើរការ សេវាកម្មពិសោធន៍ REAL-TIME PCR សម្រាប់ធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យជម្ងឺរលាកថ្លើមប្រភេទ B, C ដែលពិនិត្យព្យាបាល ដោយវវេជ្ជបណ្ឌិតវៀតណាម ឯកទេសជម្ងឺរលាកថ្លើម មកពីមន្ទីរពេទ្យ ជោរៃ វៀតណាម ។
បញ្ជុះតម្លៃ 10% លើសេវាកម្មពិសោធន៍ Real-Time PCR ចាប់ពីថ្ងៃទី 15/02/2019 ដល់ថ្ងៃទី 15/03/2019

  I. តើអ្វីទៅជា REAL-TIME PCR ?
Real-time polymerase chain reaction (Real-Time PCR) ត្រូវបានគេស្គាល់ផងដែរថា quantitative polymerase chain reaction (qPCR) គឺជាបច្ចេកទេសមន្ទីរពិសោធន៍នៃជីវវិទ្យាម៉ូលេគុលដោយផ្អែកលើ polymerase chain reaction (PCR) ។ លក្ខណៈសំខាន់ក្នុង RT-PCR គឺការរកឃើញ DNA កាន់តែច្រើនត្រូវបានគេរកឃើញនៅពេលដែល PCR កំពុងដំណើរការដោយ fluorescent reporter ។ ដូចដែលយើងនឹងឃើញ REALTIME PCR អាចឱ្យយើងវាស់បរិមាណអេឌីអេនក្នុងវត្ថុវិភាគ ។
Real-time polymerase chain reaction (Real-Time PCR), also known as quantitative polymerase chain reaction (qPCR), is a laboratory technique of molecular biology based on the polymerase chain reaction (PCR). The key feature in RT-PCR is that amplification of DNA is detected in real time as PCR is in progress by the use of fluorescent reporter. The fluorescent reporter signal strength is directly proportional to the number of amplified DNA molecules. As we will see, Real-Time PCR allows us to measure minute amounts of DNA sequences in a sample! 

12

REAL TIME PCR បានក្លាយទៅជាគ្រឹះនៃការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យម៉ូលេគុល: ការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យនិងការគ្រប់គ្រងជំងឺ:

• រាប់មេរោគ: មេរោគរលាកថ្លើមប្រភេទ B វីរុសជំងឺ រលាកថ្លើមប្រភេទ C ...
• រាប់មេរោគ: មហារីកមាត់ស្បូន (វីរុស HPV), ជម្ងឺ របេង(MTB)…..
Real-Time PCR has become a cornerstone of diagnostics in the field of molecular biology testing: v Disease diagnosis and management: • Viral quantification: Hepatitis B virus, Hepatitis C virus... • Viral quantitative: Human papillomavirus (HPV), Mycobacterium tuberculosis (MTB)... v Food testing: Bacteria in food

II. ហេតុអ្វីបានជា PCR មានសារៈសំខាន់ ?

 គុណសម្បត្តិមួយក្នុងចំណោមគុណសម្បត្តិចម្បងនៃ Real Time PCR គឺសមត្ថភាពក្នុងការសម្គាល់ចំនួនក្នុងកំឡុងពេលដំណើរការ PCR ។ Real Time PCR វាស់បរិមាណ ក្នុងដំណាក់កាលនិទស្សន្តចំណែកឯ Standard PCR វាស់បរិមាណក្នុងដំណាក់កាល Plateau ។ វាមានប្រសិទ្ធិភាពជាងមុនក្នុងការវាស់ស្ទង់អំឡុងដំណាក់កាលអិចស្ប៉ូណង់ស្យែងដោយសារតែការវាស់ស្ទង់កំឡុងពេល Plateau មិនបង្ហាញបរិមាណចាប់ផ្តើម ។ PCR ធម្មតាគឺត្រូវចំណាយពេលច្រើនជាង ព្រោះវាប្រើ gel electrophoresis ដើម្បីវិភាគផលិតផល PCR ដែលបានពង្រីករួច ។ ផ្ទុយទៅវិញ Real Time PCR ប្រើពេលវេលាតិចជាងមុនដោយសារតែវាអាចរកឃើញការកើនឡើងក្នុងដំណាក់កាលដំបូងនៃប្រតិកម្ម ។ Real Time PCR មានលក្ខណៈឆាប់ចាប់មេរោគបានជាង PCR ធម្មតា ហើយលទ្ធផលនៃ Real Tim PCR គឺច្បាស់លាស់ណាស់ និង អាចបែងចែករវាងបាក់តេរីដែលងាប់ និងបាក់តេរីរស់បាន ។ Real TimePCR ប្រើប្រព័ន្ធពណ៌ពន្លឺដើម្បីវិនិច្ឆ័យចំនួនមេរោគ ចំណែក PCR ធម្មតាប្រើ ពន្លឺកាំរស្មី UV ដើម្បីមើលឃើញរកំរិតលកក្នុង gel agarose។ គុណសម្បត្តិផ្សេងទៀតនៃ Real Time PCR ធៀបទៅនឹង PCR ធម្មតា គឺថាដំណើរការទាំងមូលពី ការពង្រីកDNA ទៅការវិភាគត្រូវបានអនុវត្តនៅក្នុងបំពង់តែមួយ។ នេះខុសពី PCR ធម្មតា ដែលផលិតផល PCR ត្រូវបានផ្លាស់ប្តូរនិងរៀបចំទៅជាទម្រង់ផ្សេង។ ជាលទ្ធផលការថយចុះលទ្ធភាពនៃការឆ្លងគ្នារជាមួយនឹងវិធីសាស្រ្ត Real Time PCR ។
1. Why PCR is important One of the primary advantages of real-time PCR is the ability to identify amplified fragments during the PCR process. Real-time PCR measures the amount of the product during the exponential phase whereas standard PCR measures product during the plateau phase. It is more effective to measure during the exponential phase because measurements taken during the plateau phase do not always clearly indicate the quantity of starting material. Conventional PCR is more time consuming as it uses gel electrophoresis to analyze the amplified PCR products. In contrast, real-time PCR is less time consuming as it can detect amplifications during the early phases of the reaction. Real-time PCR is more sensitive than conventional PCR and the results of the real-time PCR are very precise and can discriminate between dead and live bacteria. Real-time PCR uses fluorescent dye system to detect the products while conventional PCR uses ethidium bromide and UV light to visualize bands in the agarose gel medium. Another advantage of real-time PCR over standard PCR is that the entire process from amplification to analysis is performed in the same tube. This differs from standard PCR where the PCR product is moved and manipulated into other formats. As a result, there is a decreased possibility of contaminating the product with real-time PCR methods.
3

III. តើពេលណាអ្នកចាំបាច់ធ្វើការឆ្លុះ បំពង់រំលាយអាហារ?
មានវិធីសាស្រ្តពីរក្នុងការរកឃើញផលិតផល PCR ដោយ Real Time PCR ។ ទីមួយគឺផ្អែកលើការ TaqMan Probe ទីពីរផ្អែកលើ DNA-binding dyeមាន SYBR green ជាដើម ។
RT-PCR ត្រូវបានបែងចែកជា 4 ដំណាក់កាល: linear ground phase, early exponential phase, linear exponential phase (log phase) និង plateau phase ។
  • ដំណាក់កាលទីមួយ PCR គ្រាន់តែទើបចាប់ផ្តើម សញ្ញាវិទ្យុសក្មមិនទាន់ឡើងខ្ពស់ជាងផ្ទៃខាងក្រោម ។
  • ដំណាក់កាលទី 2 គឺជាចំនុចដែលសញ្ញា fluorescent កើនឡើងខ្ពស់ជាងផ្ទៃខាងក្រោមវដ្តដែលកើតឡើងដែលត្រូវបានហៅថាកម្រិតវដ្ត (Ct) ។
  • នៅដំណាក់កាលអិចស្ប៉ូណង់ស្យែលតំរែតំរង់ PCR ស្ថិតនៅដំណាក់កាលពង្រីកដ៏ល្អប្រសើរជាមួយនឹងផលិតផល PCR ទ្វេដងក្នុងគ្រប់វដ្ត ។ 
  • តំណាក់កាលចុងក្រោយគឺនៅពេលដែលស្រទាប់ខាងក្រោមត្រូវអស់កម្លាំងហើយ (Taq DNA polymerase) នៅចុងបញ្ចប់នៃជីវិតរបស់វា រលកសញ្ញា fluorescent នឹងមិនកើនឡើងទៀតឡើយ ។
1. How does Real – Time PCR work There are two detection methods or the detection of PCR products in real-time PCR.
  • The first is based on sequence-specific probe such as TaqMan probe, molecular beacon consisting of oligonucleotides that are labelled with a fluorescent reporter which permits detection only after hybridization of the probe with its complementary sequence.
  • The second is based on generic non-sequence-specific double-stranded DNA-binding dye such as SYBR green. RT-PCR can be divided into four stages: linear ground phase, early exponential phase, linear exponential phase (log phase) and plateau phase.
  • In the first phase, PCR is just starting, fluorescent signal has not risen above background. The second phase is where fluorescent signal just rise significantly above background, the cycle at which occurs is called cycle threshold (Ct). In linear exponential phase, PCR is in its optimal amplification stage with doubling PCR products in every cycle.
  • The last phase is when substrates are exhausted and Taq DNA polymerase is in its end of life, fluorescent signal will no long increase.
4

** ខ្សែកោងស្តង់ដារ
បន្ទាត់គោល - វដ្តដំបូងនៃ PCR នៅពេលដែលសញ្ញា fluorescent បង្ហាញមិនមានឬប្រែប្រួលតិចតួច។
តម្លៃ CT - វដ្តនៃការវាស់ស្ទង់ (CT) បង្ហាញពីចំនួនវដ្តដែល fluorescence ប្រតិកម្មឆ្លងកាត់កំរិត ។
ខ្សែកោងស្តង់ដារ - ខ្សែកោងដែលមានតម្លៃ CT ដែលមានចំនុចដៅផ្ទុយនឹងកំណត់ចំណាំ នៃស្តង់ដារ។ ការប្រមូលផ្តុំនៃសំណាកមិនស្គាល់ត្រូវបានដកស្រង់ចេញពីស្តង់ដារ

IV. ការប្រើប្រាស់ប្រតិកម្មនៃខ្សែប៉ូលីម៉េរ៉ា (ផលប្រយោជន៍ នៃការប្រើ REAL-TIME PCR) 
មានកម្មវិធីជាច្រើនសម្រាប់ប្រតិកម្មសង្វាក់រាប់បរិមាណ នៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍។ វាត្រូវបានគេប្រើជាទូទៅសម្រាប់ទាំងការស្រាវជ្រាវនិងរោគវិនិច្ឆ័យ។ ការប្រើបច្ចេកទេសក្នុងឧស្សាហកម្មរួមមានបរិមាណនៃការផ្ទុកមីក្រូប៊ីក្នុងអាហារឬបញ្ហាបន្លែ ការរកឃើញនៃអ័រម៉ូន GMOs និងការកំណត់បរិមាណនិងប្រភែទហ្សែនរបស់វីរុសមនុស្ស ។
  • 4.1 ការរាប់បរិមាណនៃការបញ្ចេញហ្សែន ការរាប់ចំនួនការបញ្ចេញហ្សែនតាមវិធីសាស្រ្តឌីអិនអេចាស់មានលក្ខណៈមិនត្រឹមត្រូវមិនអាចទុកចិត្តបាន។ Real Time PCR អាចត្រូវបានប្រើដើម្បីកំណត់បរិមាណ DNA ដោយវិធីសាស្រ្តទូទៅពីរ: បរិមាណធៀបនិងបរិមាណដាច់ខាត ។
  • 4.2 ការប្រើប្រាស់ក្នុងរោគវិនិច្ឆ័យ PCR រោគវិនិច្ឆ័យត្រូវបានអនុវត្តដើម្បីរកឃើញ DNA យ៉ាងឆាប់រហ័សដែលត្រូវបានគេធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យឧទាហរណ៍ជំងឺឆ្លង មហារីក និងភាពមិនប្រក្រតីនៃហ្សែន។ វត្តមានការធ្វើតេស្ត PCR ដែលមានគុណភាពនៅមន្ទីរពិសោធន៍មីក្រូជីវសាស្រ្តព្យាបាលបានធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យនៃជំងឺឆ្លងនិងត្រូវបានគេដាក់ជាឧបករណ៍ដើម្បីរកមើលជំងឺថ្មីៗដែលលេចឡើងដូចជាជម្ងឺផ្តាសាយថ្មី នៅក្នុងការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យ ។
  • 4.3 ការប្រើប្រាស់ក្នុងអតិសុខុមជីវសាស្រ្ត PCR រាប់បរិមាណក៏ត្រូវបានប្រើដោយអតិសុខុមជីវវិទូ ក្នុងវិស័យសុវត្ថិភាពចំណីអាហារការនិងការរំលាយអាហារ និងសម្រាប់ការវាយតម្លៃហានិភ័យនៃមីក្រុបរបស់គុណភាពទឹក (ទឹកផឹកនិងការប្រើប្រាស់ឡើងវិញ) និងក្នុងការការពារសុខភាពសាធារណៈ។ ដូចជា; Mycobacterium Leprae, Nesseria Meningitides, Streptococcus Suis, Escherichia Coli O157, Bordetella Pertussis, S. Aureus, Salmonella, ... ។
  • 4.4 រោគវិនិច្ឆ័យលើរុក្ខជាតិ ប្រព័ន្ធត្រូវបានអភិវឌ្ឍដែលអនុញ្ញាតឱ្យរកឃើញបរិមាណតិចតួចនៃ DNA នៃ Phytophthora ramorum, oomycete ដែលសម្លាប់ដើមរុក្ខជាតិ Oaks និងប្រភេទដទៃទៀតដែលបានលាយជាមួយ DNA នៃរុក្ខជាតិ ។
  • 4.5 វិនិច្ឆ័យការកែប្រែហ្សែននៃសារពាង្គកាយ qPCR ប្រើការចម្លងបញ្ច្រាស (RT-qPCR) អាចត្រូវបានប្រើដើម្បីរកឃើញអ័រមូនដែលមានភាពប្រែប្រួលនិង ថាមវន្តក្នុងការរក DNA ។
  • 4.6 រាប់បរិមាណមេរោគ និងការធ្វើប្រភេទហ្សែន វីរុសអាចមានវត្តមានចំពោះមនុស្សដោយសារតែការឆ្លងមេរោគដោយផ្ទាល់ឬការឆ្លងមេរោគដោយផ្ទាល់ដែលធ្វើឱ្យមានការពិបាកក្នុងការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យដោយប្រើបច្ចេកទេសបុរាណនិងអាចមានលទ្ធផល និងការព្យាបាលមិនត្រឹមត្រូវ ។ ការប្រើប្រាស់ qPCR អនុញ្ញាតឱ្យមានការធ្វើរាប់បរិមាណ និងការធ្វើប្រភេទហ្សែន ដូចជា: ដូចជាវីរុសរលាកថ្លើមប្រភេទ B វីរុសរលាកថ្លើមប្រភេទ C វីរុស Papillomavirus (HPV) , ជំងឺរបេង Mycobacterium (MTB), វីរុស Herpes Simplex (HSV), Chlamydia trachomatis (CHT), Neisseria gonorrhoeae (NGN), មេរោគគ្រុនឈាម ... 
Standard curve– a curve consisting of CT values plotted against the log of standard concentration. The concentration of unknown samples are extrapolated from the standard.
4. Applications of Real- Time Polymerase Chain Reaction (Benefits of using real-time PCR): There are numerous applications for quantitative polymerase chain reaction in the laboratory. It is commonly used for both diagnostic and basic research. Uses of the technique in industry include the quantification of microbial load in foods or on vegetable matter, the detection of GMOs (Genetically modified organisms) and the quantification and genotyping of human viral pathogens.
  • 4.1. Quantification of gene expression Quantifying gene expression by traditional DNA detection methods is unreliable. Real-time PCR can be used to quantify nucleic acids by two common methods: relative quantification and absolute quantification
  • 4.2. Diagnostic uses Diagnostic qualitative PCR is applied to rapidly detect nucleic acids that are diagnostic of, for example, infectious diseases, cancer and genetic abnormalities. The introduction of qualitative PCR assays to the clinical microbiology laboratory has significantly improved the diagnosis of infectious diseases and is deployed as a tool to detect newly emerging diseases, such as new strains of flu, in diagnostic tests
  • 4.3. Microbiological uses Quantitative PCR is also used by microbiologists working in the fields of food safety, food spoilage and fermentation and for the microbial risk assessment of water quality (drinking and recreational waters) and in public health protection. Such as; Mycobacterium Leprae , Nesseria Meningitides, Streptococcus Suis, Escherichia Coli O157, Bordetella Pertussis, S. Aureus, Salmonella,….
  • 4.4. Detection of phytopathogens Systems have been developed that allow detection of small amounts of the DNA of Phytophthora ramorum, an oomycete that kills Oaks and other species, mixed in with the DNA of the host plant. Discrimination between the DNA of the pathogen and the plant is based on the amplification of ITS sequences, spacers located in ribosomal RNA gene's coding area, which are characteristic for each taxon.
  • 4.5. Detection of genetically modified organisms qPCR using reverse transcription (RT-qPCR) can be used to detect GMOs given its sensitivity and dynamic range in detecting DNA.
  • 4.6. Clinical quantification and genotyping Viruses can be present in humans due to direct infection or co-infections which makes diagnosis difficult using classical techniques and can result in an incorrect prognosis and treatment. The use of qPCR allows both the quantification and genotyping (characterization of the strain, carried out using melting curves) of virus, Such as: such as: Hepatitis B Virus (HBV), Hepatitis C Virus (HCV), Human Papillomavirus (HPV), Mycobacterium tuberculosis (MTB), Herpes Simplex Virus (HSV), Chlamydia trachomatis (CHT), Neisseria gonorrhoeae (NGN), Dengue Virus…

Programs

Health checkup.jpg

Job Opportunity

MAP

ដំណឹងជួលទីតាំង

 

ដំណឹងជួលទីតាំង

 

មន្ទីរពេទ្យ ជោរៃភ្នំពេញ យើងខ្ញុំ មានកិត្តិយសសូមជម្រាបជូនដំណឹងដល់ម្ចាស់អាជីវកម្មទាំងឡាយ អោយបានជ្រាបថា មន្ទីរពេទ្យ យើងខ្ញុំ មានការជួលទីតាំង សម្រាប់បើកភោជនីយដ្ឋាន បើកហាងលក់វែនតា និងទីតាំងប្រកបអាជីវកម្មផ្សេងទៀត សម្រាប់បម្រើសេវាកម្មដល់ បុគ្គលិក អ្នកជម្ងឺ និងប្រជាជនទូទៅ ដែលមានព័ត៌មានដូចខាងក្រោម៖

(3393)
Read more...

Visitors

mod_vvisit_countermod_vvisit_countermod_vvisit_countermod_vvisit_countermod_vvisit_countermod_vvisit_counter
mod_vvisit_counterToday82
mod_vvisit_counterYesterday114
mod_vvisit_counterThis week451
mod_vvisit_counterLast week1323
mod_vvisit_counterThis month3352
mod_vvisit_counterLast month5122
mod_vvisit_counterAll days952756

We have: 4 guests online
Your IP: 52.201.27.211
 , 
Today: Mar 21, 2019

PROGRAMS AND PACKAGES    QUICK LINKS    ADDRESS AND HOTLINE
icon-Newen
 MEN AND WOMEN PACKAGEicon-Newen Question & Answer Page  National Road 1, Tangov, Niroth, Khan Chbar ampov, Phnom Penh


 Make Appointment (New PatientRregistered Patient) E-mail: hr@choray-pp.com.kh        info@choray-pp.com.kh
 Map and directionReceiption         : (+855) 23 684 1001 
26 Consultation roomEmergency 24h : (+855) 23 684 1002
Surgical departmentHOTLINE            : (+855) 88 2413 108